移液器知识宝典

移液器选购指南

一、产品性能,即移液器的准确性和重复性对于绝大多数用户而言,购买之前检测产品性能既有难度又无必要。因此,主要还是依据制造厂商提供的技术数据。 注意检查产品中的出场校准证书来确认产品是否达到制造厂家的承诺。

二、产品的安全可靠耐用这一方面,主要取决于移液器所用的材料。对于外壳,应当有较高的耐冲击性、耐腐蚀性和较低的导热性(如PVDF材质);对于活塞,目前市场上主要有不锈钢和塑料二种材质。不锈钢机械性能好、寿命长,只是不太适合用于强酸强碱的移液;当然,优质的材料往往意味着更高的价格,所以需要综合考虑购买价格和寿命的因素。另外安全性还体现在移液过程中是否能保证容量不发生意外变化,有容量锁定装置的最佳。

三、产品的人体工程学设计主要可以考虑以下几点:

①完成一个移液循环拇指的移动距离短,意味着舒适度更高;

②装卸吸头,同样是越省力越好,能够实现省力并且吸头安装的密封性好是最佳要求;

③比较相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,这是影响舒适性的关键,用力越少意味着长期使用造成手指损伤的风险越小;

④移液器的重量适中,过重会增加手的负担,但过轻也往往意味着材质可能差强人意;

⑤其它的辅助设计,如壳体的磨砂设计以及指钩设计,有助于进一步提高舒适性。

常用移液方式

一、两种移液原理

1、空气正压式移液

● 空气处于活塞和液体 之间

● 最常用的原理

● 推荐:

-水溶液

● 无法杜绝污染物,需要

● 滤芯吸头-安全圆锥 过滤器

● 需要良好的移液技术和经验

● 对环境变化更敏感(温度,气压)

● 成本低

2、活塞正移动式移液

● 液体和活塞之间的接触

● 完全免除污染

● 推荐:

-高粘性液体

-挥发性液体(如乙醇)

-泡沫液 体

● 准确性高

● 代价昂贵

二、怎么确定自己要使用哪种技术?

空气正压式移液技术

1、正向移液(P)

● 最常用的技术

● 大容量

● 水溶液

● 含有少量 洗涤剂或蛋白质 液体

● 溶剂(需要预冲洗)

正向移液操作步骤:

● 将操作按钮按至第一停顿位置

● 将吸头刚刚浸没在液面以下(2-3毫米)。

● 平稳地松开按钮,然后等待片刻。

● 再将按钮置于第二个停顿位置,将液体排出。

2、反向移液(rP)

● 吸取实际容量+一定过量液体

● 生物液体

● (富含蛋白质或洗涤剂)的泡沫液体

● 高粘度液体

● 小容量液体

● 要求高准确度 和精度

反向移液的步骤:

● 将按钮置于第二个停顿位置

● 将吸头刚刚浸没在液面以下(2-3毫米)。

● 平稳地松开按钮

● 再将按钮置于第一个停顿位置将液体排出

● 将按钮按置于第二停顿位置废弃过量液体

精确度和准备度的定义

准确度

  • 有可能很一致,但是这种一致性可能是错误的。
  • 批内差是指一组重复测量的平均值与真值之间的数值差异。

精确度

  • 精确度是指几次重复测量值相同。
  •  高精确度,即低批间差,意味着同一样本多次测量之间的结果差异很小。

移液器常见问题及解决方法

移液器,基本上千亿国际娱乐平台每个人都会在实验中用到,但是也发现有很多问题。

一、常见问题

A.活塞/吸头 泄漏

B.吸头不适合移液器

C.二次使用吸头

D.移液器吸头没有碰到容器壁

E.湿度差异

F.没有预先清洁

G.移液节奏和时间不平稳

H.吸头深度和移液角度不正确

I.活塞运动不平稳

J.移液器,液体和室温之间存在温度差

 

二、正确移液操作

1.在吸取液体时要移液器垂直

2.将吸头浸在液体表面以下2-3毫米处

3.在移液时进行3-5次预洗

4.在吸取液体后,应有间隔地暂停

5.以30 -45°的角度释放液体

6.移液器应顶住接收容器的内壁

7.用大拇指平稳操作

三、总结

1.就不同液体类型,选择正确的移液模式

2.使用移液器生产商的原配吸头

3.选择容量小的吸头(将空气量减到最小)

4.将移液器,吸头和液体保持在同一温度

5.使用正确的移液技术

6.减少使用手动移液器和吸头,或者使用具有隔热功能的移液器(mLINE, Proline Plus)

移液器维护

一、移液器放置

每天用完回归最大量程,放到移液器支架上

二、移液器清洁

1 移液器外表面的日常清洗

移液器的外表面进行清洗和除污,可以使用一块无绒软布。也可以使用乙醇 (70%)、异

丙醇 (60%) 和柔和洗涤剂作为清洗剂。使用一块湿布轻轻擦洗移液器外表面,并将其擦干。要特别留意吸头圆锥。需要时请更换吸头圆锥滤器

2 移液器内部的清洗和除污

移液器内部清洁,先将移液器下半部分拆卸下来,其中塑料部件(套柄等)采用与外部清洁一致的方式即可;活塞清洁可用双蒸水(或先用异丙醇冲洗再用双蒸水洗净),晾干即可(需要涂密封油脂的移液器还需要涂上密封油脂)。

三、 移液器灭菌

整套移液器可通过在 121°C (252°F)、1 atm 下用高温高压蒸汽处理 20 分钟进行灭菌。对于单道移液器,无需进行特殊准备即可进行高温高压灭菌。对于多道移液器,握住连接环管并将下面部分逆时针转动 360°,将多道移液器的下面部分拧下,将移液器放在灭菌袋中,并将灭菌袋放在高压灭菌器中。在经高温高压灭菌后,必须将移液器冷却,并在使用之前隔夜干燥。

建议在每次高温高压灭菌之后,对移液器的性能进行检查。另外还建议在每 10 次高温高压灭菌之后,对移液器的活塞/密封件涂油脂。

四、移液器密封性检查

1 绝大部分移液器不准是由于移液器漏气造成,漏气的原因有:

吸头不匹配,吸头质量不合格,吸头未上紧,移液器自身气密性不好

2 移液器自身气密性检查

2.1 简单目视法检测:取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水。200ul以下的移液器,请将吸头浸入液面1-2mm,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降,如果下降,就说明手中的移液器出现了漏气的情况;1000ul以上的移液器,请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴,如果下滴,说明手中的移液器出现了漏气的情况

2.2 专业压力泵检测

五、校准

称量法:设置移液器量程,用移液器吸取一定体积的去离子水,然后天平称重。根据当时的温度,湿度,气压换算成实际体积,可以得知移液器的准确度。

分光光度法:用移液器吸取已知浓度有色物质,然后加入一定体积纯水中,比色发测定稀释倍数,可推算出移液器准确度。

 

影响移液效果的因素

一、移液器

1、质量

2、隔热性

3、其它条件

3.1 清洁的移液器可以确保效果最佳

3.2 定期进行保养

二、吸头

1、质量

2、类型/尺寸

3、材料

4、是否匹配移液器

三、环境

1、温度

2、湿度

3、气压

为了避免不准确的移液结果:

①应将移液器,吸头,和液体保持在同一温度内,最好是室温

②对温度较低的液体进行移液时,不要预洗吸头。在每次分液后更换吸头,以防止吸管温度的变化

四、人为错误

1、性格,技术

2、经验

使用手动移液器需要专业技能,才能取得精确结果。但是电动移液器可以让每个使用者得到准确的结果

3、劳损(重复性肌肉劳损)

重复过度操作导致精确度下降

在5小时内对移液器进行测试。期间进行每组5次重复称量500μl,共180次取平均值。由同一位经过培训的测试员完成。ISO8655-2 标准中允许的最大错误率是0.30%CV。使用轻便的mLINE可以在整个期间保持较低的错误率

五、移液原理

1、空气正压式移液

2、活塞正移动式移液

六、移液技术

1、正向移液或反向移液,主要取决于液体种类和粘度,等等…

①使用反向移液技术,移液结果将会更加精确。

②电动移液器进行多次分液,将会得到最准确和精确的移液结果。

2、预洗吸头

预先清洗吸头3-5次,可以得到最佳移液效果

3、移液角度

在移液时,尽可能的将移液器保持垂直。

4、移液节奏

活塞下压的速度和平稳性,达到最好的操作一致性,使用电动移液器,只需很少的人为操作,操作的一致性可提高移液准确性

(完)

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